Выведение культуры микроорганизмов с высоким кератинолитическим индексом
выведение культуры микроорганизмов с высоким кератинолитическим индексом
Амплификация и клонирование целевого гена соответствующие экспрессионные векторы. Определить последовательность клонированного гена (чтобы исключить делеции, мутации и инсерции);
ОСНОВНЫЕ НАПРАВЛЕНИЯ РАБОТЫ:
Получение экспрессионную плазмиду и трансформировать клетки E. Coli, Получение ГМО штаммов и скрининг результатов трансформации. Накопление и выделение достаточного для трансформации количества ДНК (около 10 мкг);
Скрининг целевых и базовых активностей; Масштабирование и получение фермента; Биохимический анализ; Подбор оптимальных условий для проведения ферментации природных кератинсодержащих компонентов в различных условиях.
Первичный скрининг рекомбинантных клонов методом полимеразной цепной реакции (ПЦР); Секвенирование гена при наличие возможности, определения хромосомной интеграции целевых генов; Лабораторная ферментация в колбах субстрата